Rosetta(DE3)
Rosetta(DE3)是一种常用的大肠杆菌表达系统,为研究人员提供了一种高效、可靠的蛋白质表达工具。该系统基于目前流行的pET表达系统,具有良好的表达效率和稳定性,在科学研究和工业应用中得到了广泛应用。
Rosetta(DE3)是一种常用的大肠杆菌表达系统,为研究人员提供了一种高效、可靠的蛋白质表达工具。该系统基于目前流行的pET表达系统,具有良好的表达效率和稳定性,在科学研究和工业应用中得到了广泛应用。
Rosetta(DE3)的核心组成部分是大肠杆菌strains BL21(DE3)和plysS,其中BL21(DE3)是一种快速生长的菌种,适合大规模表达;而plysS则是一种抑制菌体蛋白表达的转录抑制物,通过抑制菌体蛋白的表达,增加溶胞蛋白的含量。
Rosetta(DE3)的优势主要体现在以下几个方面:
1. 高效表达:Rosetta(DE3)系统通过将质粒中的目标基因表达到重组大肠杆菌宿主中,以高效表达蛋白质。菌株BL21(DE3)具有增强的T7 RNA聚合酶的表达,可以实现高效的转录产物,从而提高蛋白质表达效率。
2. 溶胞蛋白丰富:通过引入plysS抑制体蛋白的表达,Rosetta(DE3)系统可以实现溶胞蛋白的丰富表达。多亲和层析、离子互换层析等方法可以用于纯化溶胞蛋白,为后续的蛋白质功能研究提供了高质量的样品。
3. 异源蛋白折叠:Rosetta(DE3)系统还具有异源蛋白折叠和形态表达的能力。该系统可通过调整培养条件和诱导温度等因素,使得异源蛋白在大肠杆菌中得以正确折叠,并形成可溶性蛋白。
4. 丰富的基因工具:Rosetta(DE3)系统的宿主菌株BL21(DE3)具有多个常用基因工具,包括T7-promoter driven expression、kanamycin resistance,提供了更多的选择和便利。
总之,Rosetta(DE3)是一款广泛应用于蛋白质表达和研究领域的高效表达系统。其高表达效率、丰富的溶胞蛋白、异源蛋白折叠以及多种基因工具等优势,使其成为研究人员在蛋白质研究中不可或缺的重要工具。